แบคทีเรีย วิธีการย้อมแกรมสามารถแบ่งแบคทีเรียออกเป็น 2 ประเภท ด้วยวิธีย้อมสีนี้ แบคทีเรียจะถูกย้อมด้วยสีม่วง โดยครั้งแรกแบคทีเรียทั้งหมดจะย้อมสีม่วง เคลือบด้วยของเหลวไอโอดีน เพื่อเพิ่มความแข็งแรงของสีย้อมและแบคทีเรีย แล้วใช้แอลกอฮอล์ 95 เปอร์เซ็นต์เพื่อทำให้สีตก 20 ถึง 30 วินาที
แบคทีเรียบางตัวจะไม่เปลี่ยนสีแต่ยังเก็บสีม่วงไว้ แบคทีเรียบางตัวจะเปลี่ยนสีและไม่มีสี โดยสุดท้ายเป็นสีแดงอีกครั้ง หลังจากการย้อมสีเป็นเวลา 1 นาที แบคทีเรียที่มีรับเพื่อขจัดสีออกไป โดยจะทำการย้อมสีแดงและแบคทีเรียที่ไม่ได้ ย้อมสี ซึ่งยังคงมีสีม่วง ด้วยวิธีนี้เชื้อแบคทีเรียที่มีการย้อมสีม่วงที่เรียกว่า แบคทีเรียแกรมบวก หากย้อมสีแดงที่เรียกว่า เชื้อแบคทีเรียแกรมบวกหรือเชื้อแบคทีเรียที่เป็นลบ
ความสำคัญของวิธีการย้อมสีแกรมคือ การระบุแบคทีเรีย และแบ่งแบคทีเรียจำนวนมากออกเป็น 2 ประเภท ได้แก่ แบคทีเรียแกรมบวก แบคทีเรียแกรมลบ เดอร์โมเนคโครติคทอกซิน ส่วนใหญ่เป็นแบคทีเรียแกรมบวก ซึ่งสามารถผลิตเนื้อเยื่อ เพื่อทำให้คนป่วย ในขณะที่แบคทีเรียในลำไส้ส่วนใหญ่เป็นแบคทีเรียแกรมลบ
เชื้อแบคทีเรียที่พบบ่อยแกรมบวกได้แก่ สแตฟฟิโลคอคคัส สเตรปโตคอกคัส สเตรปโตค็อกคัสนิวโมเนีย จุลินทรีย์ โรคคอตีบ บาดทะยัก รวมถึงแบคทีเรียแกรมลบมีชิเกลลา ไทฟอยด์ เอสเชอริเชียโคไล ซูโดโมแนสแอรูจีโนซาบาซิลลัส ทำให้เกิดไอกรน วิบริโอคอเลอเร และเมนิงโกค็อกคัส ในแง่ของการรักษาแบคทีเรียแกรมบวกส่วนใหญ่ไวต่อยาเพนิซิลลิน
ในขณะที่แบคทีเรียแกรมลบไม่ไวต่อเพนิซิลลิน แต่ไวต่อสเตรปโตมัยซิน และคลอแรมเฟนิคอล ดังนั้นจึงมีความสำคัญอย่างยิ่ง ในการเลือกยาปฏิชีวนะเพื่อแยกแยะว่า แบคทีเรียที่ทำให้เกิดโรคคือ แบคทีเรียแกรมบวกหรือแบคทีเรียเชิงลบแบคทีเรียผนังเซลล์หนา รวมถึงโมเลกุลของเครือข่ายเปบทิโดไกลแคน ทำให้เกิดก่อตัวโดยเป็นอุปสรรคในการซึมผ่าน
เมื่อเอทานอลถูกกำจัดสี เปปติโดไกลแคนจะคายน้ำ และอุปสรรคของรูพรุนจะหดตัวลง ดังนั้นคริสทัลไวโอเล็ตไอโอดีนคอมเพล็กซ์จะยังคงอยู่บนเยื่อหุ้มเซลล์ ทำให้มันเป็นสีม่วงแบคทีเรียชั้นเปบทิโดไกลแคน ซึ่งจะเชื่อมขวางอย่างหลวมๆ การลดสีของเอทานอล ไม่สามารถทำให้โครงสร้างหดตัว ปริมาณไขมันของมันสูง เอทานอลจะละลายไขมัน รวมถึงช่องว่างจะขยายใหญ่ขึ้น
คอมเพล็กซ์คริสตัลไวโอเล็ตไอโอดีน ซึ่งจะละลายออกจากผนังเซลล์ของแบคทีเรียแกรมบวก มักจะมีความหนาประมาณ 20 ถึง 80 นาโนเมตร โดยมีแผ่นเปปติโดกลีแคน 15 ถึง 50 แผ่น มีกรดเทโชอิก 20 ถึง 40 เปอร์เซ็นต์ โดยผนังเซลล์ของแบคทีเรียแกรมลบ มีความหนาประมาณ 10 นาโนเมตร มีเปปติโดกลีแคนเพียง 2 ถึง 3 ชั้น
นอกเหนือจากไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ เยื่อหุ้มชั้นนอกของแบคทีเรียและไลโปโปรตีน ในปัจจุบันมีมุมมอง 3 ประการเกี่ยวกับหลักการของการย้อมสีแกรม โดยทฤษฎีจุดไอโซอิเล็กทริก ทฤษฎีเคมีและทฤษฎีออสโมซิส ตามทฤษฎีของจุดไอโซอิเล็กทริก จุดไอโซอิเล็กทริกของแบคทีเรียแกรมบวกอยู่ที่พีเอช 2 ถึง 3 ซึ่งต่ำกว่าแบคทีเรียเชิงลบ
นอกจากนี้ ไอโอดีนยังเป็นตัวออกซิไดซ์ที่อ่อนแอ ซึ่งสามารถลดไอโซอิเล็กทริกได้ จุดของแบคทีเรียแกรมบวกทำให้เกิด 2 ประเภท ส่งผลต่อความแตกต่างในจุดไอโซอิเล็กทริกของแบคทีเรียขยายใหญ่ขึ้น ดังนั้นแรงยึดเหนี่ยวของแบคทีเรียบวก และสีย้อมพื้นฐานจะแข็งแกร่งกว่าแบคทีเรียเชิงลบ
ตามเคมีแล้ว สารละลายไอโอดีนจะรวมกับคริสทัลไวโอเลตในร่างกายของแบคทีเรีย แล้วรวมกับคอมเพล็กซ์แมกนีเซียมเกลือ และโปรตีนของกรดไรโบนิวคลีอิกของแบคทีเรีย การรวมกันนี้ไม่ใช่เรื่องง่ายที่จะกำจัดอะซิโตนแอลกอฮอล์และกรัม ส่งผลให้คราบเป็นบวก เพราะแบคทีเรียแกรมลบ เนื่องจากขาดแมกนีเซียมเกลือของกรดอาร์เอ็นเอ เนื่องจากมีปริมาณเพียงเล็กน้อยของไอโอดีน รวมถึงคอนจูเกตสีม่วงคริสทัลและพวกเขาจะไม่แข็งแรง
จากนั้นจะขจัดสีออกไปได้อย่างง่ายดาย โดยเครื่องดื่มแอลกอฮอล์อะซีโตน จากนั้นกลายเป็นแกรมลบ ตามทฤษฎีของออสโมซิส เอทานอลจะคายน้ำ รูปร่างของแบคทีเรียที่มีอยู่ในแบคทีเรียในเชิงบวก ซึ่งช่วยลดช่องว่างระหว่างผนังเซลล์และลดการซึมผ่าน สารย้อมไอโอดีนที่ซับซ้อนยังคงอยู่ในร่างกายของแบคทีเรียซึ่งเป็นสีม่วง แบคทีเรีย เชิงลบประกอบด้วยกรดอะมิโน แต่จะน้อยกว่าผนังเซลล์ไม่เปลี่ยนแปลงมากนัก การซึมผ่านไม่ได้รับผลกระทบ คอมเพล็กซ์ย้อมไอโอดีนในแบคทีเรียมองเห็นได้ง่ายกว่า สูญเสียสีม่วง และการถูกย้อมเป็นสีแดง
อ่านต่อได้ที่ ช่องคลอด การสวนล้างช่องคลอดปลอดภัยหรือไม่
